紫外可(kě)見分光光度計(jì)在一個(gè)波長,一個(gè)溶液的總吸光度是等于各個(gè)成分的吸光度的總和(hé)。根據這點就可(kě)分析混合物的各個(gè)組分。
如果有(yǒu)一種混合物,雖然是多(duō)組分,但(dàn)組分吸收帶不相重叠。紫外可(kě)見分光光度計(jì)在某波長一種組分的吸收很(hěn)大(dà),而其它組分在此波長則無吸收。這樣就可(kě)在此波長采用上(shàng)述的标準曲線法進行(xíng)此組分的定量測定。 如果一個(gè)多(duō)組分混合物,其吸收帶雖然相互重叠,但(dàn)能遵守比耳定律,則可(kě)以采用解聯立議程式的辦法來(lái)進行(xíng)定量。如混合物中含有(yǒu)n個(gè)已知組分,則需在n個(gè)适當的波長進行(xíng)n次組分各自在n個(gè)波長的摩爾吸光系數(shù)。波長的選擇應注意使一個(gè)組分的吸光系數(shù)比其它組分的吸光系數(shù)大(dà),這樣才能得(de)到較高(gāo)的精确度。
如果混合物中的幾個(gè)組分吸收帶相互重叠的并且不遵守比耳定律,便不能用解聯立方程式的辦法來(lái)解析。此時(shí)用分光光度法定量比較困難。Fry采用校(xiào)正法把混合樣品中的五個(gè)組分配成不同的溶液,得(de)到一系列校(xiào)正曲線。在校(xiào)正曲線的基礎上(shàng),解析得(de)到了五組分的含量。但(dàn)方法十分繁瑣,使用不便。
如果混合物中含有(yǒu)未知吸收帶的組分就更困難了。此時(shí)最好先用化學法分離純化。但(dàn)也可(kě)直接利用分光光度法來(lái)分析。Morton利用有(yǒu)雜質存在吸收光譜形狀的改變計(jì)算(suàn)混合物中含有(yǒu)雜質時(shí)魚肝油的量。雖然利用分光光度法可(kě)以作(zuò)多(duō)組分分析,但(dàn)方法比較繁瑣。近年來(lái),很(hěn)多(duō)分光光度計(jì)設有(yǒu)多(duō)組分分析附件。借助于微處理(lǐ)機來(lái)分析計(jì)算(suàn)混合物中多(duō)種組分的含量,十分簡便、迅速、準确。使得(de)分光光度法在混合的定量分析中發揮更大(dà)的作(zuò)用。可(kě)用導數(shù)光譜法來(lái)定量。