餐飲回收油檢測方法包使用說明(míng)書(shū)
1        适用範圍
适合大(dà)豆油、花(huā)生(shēng)油、菜籽油、葵花(huā)籽油、調和(hé)油和(hé)色拉油中含餐飲回收油的測定方法。
2        原理(lǐ)
    食用植物油經高(gāo)溫加熱和(hé)反複使用産生(shēng)某些(xiē)極性物質（如油脂本身的碎裂、産生(shēng)的丙稀酰胺、多(duō)環芳烴、食品自身極性成分溶入等），對回收油進行(xíng)一般提煉處理(lǐ)時(shí)可(kě)部分清除這些(xiē)極性物質，但(dàn)仍會(huì)有(yǒu)一部分極性物質的殘留。用Cleanert EOS吸附型固相萃取小(xiǎo)柱分離植物油中的主體(tǐ)成分甘油三脂，富集甘二脂以下的相對極性較弱的物質，用矽膠薄層層析闆對富集物進行(xíng)展開(kāi)、顯色，可(kě)觀查到這些(xiē)殘留極性物質呈現“拖尾”現象，與未使用過的植物油有(yǒu)明(míng)顯差異。
3  試劑及材料：
3.1  Cleanert EOS固相萃取柱 (P/N: EOS200012)；
Agela 專用矽膠TLC闆 (P/N: T-CS2020-E)；
3.2    層析闆展開(kāi)劑：苯/乙酸乙酯/乙醚/冰乙酸=80/10/10/0.2（V/V）。
3.3  層析闆顯色溶液：10.0g磷钼酸，溶解于無水(shuǐ)乙醇中定容至100 mL。
3.4   陰性對照樣品：标準食用植物油陰性對照樣品：未經加熱處理(lǐ)過的食用植物油，例大(dà)豆、花(huā)生(shēng)、葵花(huā)、菜籽油。使用前加入同樣量的石油醚稀釋一倍上(shàng)樣。
3.5   陽性對照樣品：将食用植物油燒至發煙，保持30min後，涼至80℃并保持，按照5 % （W/V）的比例加入三矽酸鎂或酸性活性白土，用玻棒攪動30min ，冷至室溫。用中速定性濾紙過濾後作(zuò)為(wèi)陽性對照品。
4         試樣制(zhì)備
4.1  稱取均勻的油樣2 g（±0.0001g）于10mL具塞塑料試管中，加入2 mL石油醚渦旋混合。
4.2  固相萃取：将Cleanert EOS固相萃取小(xiǎo)柱固定于12位固相萃取裝置上(shàng)，用4.0mL石油醚活化小(xiǎo)柱，待石油醚自然流盡時(shí)，将稀釋好的待測油樣注入小(xiǎo)柱中，待樣液自然流盡時(shí)，用6.0mL石油醚洗淨樣品試管和(hé)萃取小(xiǎo)柱柱壁，再用10.0mL石油醚重複洗滌一次。于層析柱下端換上(shàng)一2mL具塞塑料試管，用2.0 mL丙酮洗脫氧化鋁固相萃取小(xiǎo)柱，收集流出液，混合均勻後用于薄層層析法的點闆。同時(shí)将陰性對照樣品和(hé)陽性對照樣品按上(shàng)法處理(lǐ)好備用。
4.3   薄層層析：取出矽膠層析闆，用細鉛筆在距離薄層層析闆下端1.5 cm的位置畫(huà)好點樣線，在線上(shàng)每相隔約1.5 cm處标上(shàng)點樣位置，注明(míng)樣品标記。用平頭微量進樣器(qì)或薄層點樣管在标記處點樣2.0 μL處理(lǐ)好的點樣溶液，使點樣斑的直徑不要大(dà)于3mm ，同時(shí)在每張闆的相同點樣水(shuǐ)平線上(shàng)點上(shàng)陰性對照樣品和(hé)陽性對照樣品的處理(lǐ)溶液各2.0 μL。把層析闆放入裝有(yǒu)展開(kāi)劑的展開(kāi)槽中，先用展開(kāi)劑蒸汽飽和(hé)15分鍾後，再按傾斜上(shàng)行(xíng)法展開(kāi)7cm ，從展開(kāi)槽中取出薄層闆，于通(tōng)風環境中自然揮幹溶劑10分鍾後待顯色。
4.4  将顯色劑均勻噴霧層析闆上(shàng)，于通(tōng)風環境中自然揮幹溶劑，放入120℃的恒溫幹燥箱中烘5min使之顯色，待出現藍(lán)色清晰的圓形斑和(hé)線性條紋後，取出，冷至室溫，觀察結果。
4.5  判定
正常的植物油樣品在薄層闆上(shàng)展開(kāi)後的顯色斑點呈不連續的圓形斑點，從上(shàng)至下的斑點依次為(wèi)甘油三脂、甘油二脂、單甘油脂、遊離脂肪酸和(hé)磷脂，随不同的植物油脂種類不同其斑點的深淺、大(dà)小(xiǎo)會(huì)略有(yǒu)不同，但(dàn)展開(kāi)闆下方（極性區(qū)）沒有(yǒu)明(míng)顯的“拖尾”線，樣品的點樣處沒有(yǒu)肉眼可(kě)見的點樣斑存在。如果在展開(kāi)闆下方（極性區(qū)）有(yǒu)明(míng)顯“拖尾”線，樣品的點樣處有(yǒu)清晰的點樣斑點存在，即可(kě)判斷樣品中含有(yǒu)餐飲回收油。觀察結果的同時(shí)參看陰性對照油和(hé)陽性對照油。陰性對照油和(hé)陽性對照油的薄層色譜圖參考附錄A。
 
附錄 A  資料性附錄
陰性對照油和(hé)陽性對照油的薄層色譜圖

 
圖A.1陰性對照油和(hé)陽性對照油的薄層色譜圖