時(shí)間(jiān):2015-11-13 09:19 來(lái)源:未知
大(dà)家(jiā)使用的液相色譜柱最多(duō)的就是C18了,我在這裏討(tǎo)論的也就是這個(gè)類型的。由于使用液相很(hěn)久了,聽(tīng)了大(dà)家(jiā)的很(hěn)多(duō)討(tǎo)論,也咨詢過很(hěn)多(duō)廠家(jiā)工程師(shī),同時(shí)也聽(tīng)過一些(xiē)講座,于是把這個(gè)方面的知識總結了一下。也許你(nǐ)對這些(xiē)知識很(hěn)熟悉了,在平時(shí)就這麽做(zuò)的,但(dàn)對于剛接觸色譜柱的朋友(yǒu)也許有(yǒu)點小(xiǎo)幫助。好了,進入正文。
1.色譜柱的流向不能改變
在我們常規思維中,色譜柱上(shàng)标示的流向是不可(kě)改變的,每次使用都要遵循。可(kě)是,大(dà)家(jiā)有(yǒu)沒有(yǒu)想過這個(gè)方向的作(zuò)用是什麽呢?為(wèi)什麽要标示一個(gè)使用方向呢?
其實色譜柱前後端的填料及填裝工藝都是一樣的,标示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個(gè)方向流入色譜柱,那(nà)麽這個(gè)流入段就是最先污染端。這樣就為(wèi)我們日後維護或再生(shēng)色譜柱做(zuò)了準備,而我們需要遵循這個(gè)規定應該在色譜柱開(kāi)始做(zuò)樣後。
我曾将已經污染過的色譜柱反方向來(lái)使用,如果保留時(shí)間(jiān)不是很(hěn)長,而色譜柱足夠長,還(hái)是能使用一段時(shí)間(jiān)的。
2.不去看說明(míng)書(shū),直接就上(shàng)機使用
色譜柱內(nèi)部保存着什麽溶劑一定要看清楚,因此色譜柱的說明(míng)書(shū)一定要看清楚,當然也包括說明(míng)書(shū)上(shàng)建議的維護保養規定,對我們都非常的有(yǒu)用。對于反相柱來(lái)說,溶劑基本就是乙腈或甲醇。但(dàn)正相柱就不同了,因為(wèi)正相柱除了可(kě)以适用正相系統,也可(kě)以适用反相系統,因此一定要看清楚,對于你(nǐ)的方法來(lái)說是否需要置換色譜柱內(nèi)部保存溶劑。
3.用純水(shuǐ)沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗幹淨
使用強溶劑沖洗色譜柱對內(nèi)部填料的損傷是最大(dà)的,尤其是純水(shuǐ),除非你(nǐ)的色譜柱是耐水(shuǐ)的。沖洗色譜柱最好的方法是用流動相比例的水(shuǐ)系和(hé)有(yǒu)機系來(lái)沖洗。如果你(nǐ)認為(wèi)流動相比例無法把色譜柱沖洗幹淨或者此比例中有(yǒu)機系占有(yǒu)比例過大(dà),你(nǐ)可(kě)以使用內(nèi)含10%左右的純水(shuǐ)來(lái)沖洗。
4.保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可(kě)以直接使用
理(lǐ)論上(shàng)液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化,但(dàn)是由于液相色譜柱內(nèi)部保存的有(yǒu)機系具有(yǒu)揮發性,因此在使用前還(hái)是應該用小(xiǎo)流速的和(hé)色譜柱內(nèi)部相同的溶劑沖洗一定的時(shí)間(jiān)。可(kě)以是0.5ml/min,120min,但(dàn)最好咨詢廠家(jiā),根據色譜柱參數(shù)設定。
5.色譜柱應該保存在純乙腈或甲醇中
根據第4條,色譜柱內(nèi)部保存液具有(yǒu)揮發性,因此為(wèi)了減少(shǎo)其揮發速度,可(kě)以添加5%-10%的水(shuǐ),這樣的話(huà)可(kě)以在一定程度上(shàng)減少(shǎo)一些(xiē)有(yǒu)機系的揮發。如果再增加一個(gè)保險,我們可(kě)以在堵緊堵頭後,再用封口膜封起來(lái)。同樣道(dào)理(lǐ),色譜柱一段時(shí)間(jiān)不用後,也應該按照第4條,進行(xíng)小(xiǎo)流速的沖洗色譜柱。
6.色譜柱污染後把篩闆卸下來(lái)超聲清洗
對于色譜柱的污染,首當其沖的就是篩闆,因此我們最常用的做(zuò)法就是把柱頭卸下來(lái),把篩闆拿(ná)去超聲清洗。但(dàn)是我們在拆卸過程中對色譜柱前端填料的損害遠遠大(dà)于污染照成的傷害,因為(wèi)我們不是專業的。因此建議這一步能不做(zuò)就不做(zuò)。
7.自己填裝色譜柱
和(hé)第6條相同,這一步做(zuò)法幾乎可(kě)以把此色譜柱判死刑了,我們的填裝工具有(yǒu)什麽呢?就是手工的,其填裝壓力遠遠小(xiǎo)于工廠內(nèi)原始的填裝壓力。那(nà)麽我們填裝的結果會(huì)是個(gè)什麽樣也就很(hěn)明(míng)顯了。
在我看來(lái),自己填裝也就是練練手,熟悉一下這個(gè)過程,要把色譜柱維修好的可(kě)能性幾乎為(wèi)零。
8.用異丙醇沖洗再生(shēng)後,柱子效果更差了
這種情況我自己就遇到過,還(hái)好那(nà)根柱子本來(lái)就打算(suàn)報廢了,因此也沒有(yǒu)照成多(duō)少(shǎo)損失。但(dàn)是這是什麽原因呢?其實很(hěn)簡單,就是在我反向沖洗前沒有(yǒu)把管路中的污染物沖洗幹淨就直接接了柱子。所以說,方法是沒有(yǒu)錯的,色譜柱受污染時(shí),我們應該先想到儀器(qì)也污染了!